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ELISA試劑盒真?zhèn)伪鎰e？
2018-09-04 瀏覽次數(shù)：3506
近年來，隨著國(guó)內(nèi)生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展越來越大，一些不良商家開始賣一些假冒試劑盒，給科研工作者帶來了很多的麻煩，浪費(fèi)了標(biāo)本，還影響了實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。小編特整理了一些鑒別假冒偽劣ELISA試劑盒的方法供廣大科研工作者和用戶參考，希望對(duì)廣大科研工作者有所幫助。
購(gòu)買前
【方法一】向廠家索要或下載說明書，查找ELISA的性能指標(biāo)：準(zhǔn)確度(加標(biāo)回收率、稀釋線性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準(zhǔn)。一般來說，除了校準(zhǔn)不一定每份說明書都有外，其余的指標(biāo)一般都需要羅列(部分樣本需要高倍稀釋的，可能沒有準(zhǔn)確度這個(gè)指標(biāo))。如果無法提供這些性能指標(biāo)，則說明該試劑盒可能是假貨，或者試劑盒開發(fā)過程不夠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，有可能無法檢測(cè)出真實(shí)的樣本值。
【方法二】對(duì)于夸大ELISA涵蓋的指標(biāo)的范圍，尤其是不常見的種屬，可先去ELISA試劑盒供應(yīng)商(如eBioscience、R&D)上搜索，如果搜索不到該種屬的ELISA試劑盒，則有可能是假貨，需要小心謹(jǐn)慎。
【方法三】將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索，有的論壇如丁香園等會(huì)有打假曝光臺(tái)。
購(gòu)買后
【方法一】檢查說明書、包裝盒的質(zhì)量，通常假冒偽劣產(chǎn)品為了降低成本，印刷的質(zhì)量會(huì)比較差。其次仔細(xì)閱讀說明書，如上所示查找ELISA的性能指標(biāo)。
【方法二】
I.如果購(gòu)買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B，利用交叉實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否造假，方法如下：
(1) 取出購(gòu)買的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行，加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物。
(5) 實(shí)驗(yàn)完畢后，檢測(cè)兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B，即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6) 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的不同指標(biāo)，試劑盒A只能檢測(cè)A，不能檢測(cè)B，即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
II. 利用干擾實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測(cè)目的抗原，方法如下：
(1) 將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測(cè)抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液
(2) 37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測(cè)抗體
(3) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行，加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物
(4) 實(shí)驗(yàn)完畢后，檢測(cè)其標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是非目的抗原，該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(5) 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性，則說明試劑盒檢測(cè)抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測(cè)作用，則該試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是目的抗原。
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