技術文章 / article
顆粒體蛋白GRN試劑盒說明書
2016-03-01 瀏覽次數(shù)：2464
一.顆粒體蛋白GRN試劑盒背景介紹:
顆粒體蛋白(GRN)在人類中由 GRN 基因編碼。它的前體蛋白 — 顆粒蛋白前體，又名畸胎瘤細胞源性生長因子。信號肽被剪切后可產(chǎn)生成熟的 GRN，進一步剪切可產(chǎn)生許多分子量為 6 kDa的活性多肽。肽和完整的 GRN 都可調(diào)節(jié)細胞生長。然而，GRN 蛋白家族的不同成員可能對細胞生長產(chǎn)生抑制和/或促進作用。GRN 家族成員對正常發(fā)育、傷口愈合和腫瘤發(fā)生有重要作用。GRN可能有細胞因子樣活性，可在炎癥、創(chuàng)傷修復和組織重塑中發(fā)揮作用。
人肝吸蟲可分泌類似 GRN 的生長激素，從而導致膽管癌的發(fā)展。GRN 基因突變可通過高外顯率的常染色體顯性遺傳，產(chǎn)生zui高達 25%的額顳葉變性。
二. 顆粒體蛋白GRN試劑盒檢測原理：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。特異性抗人 GRN 單克隆抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、檢測樣本和辣根過氧化物酶標記的檢測抗體，經(jīng)過孵育，樣本中存在的 GRN 與固相抗體和檢測抗體結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中 GRN 的濃度成正比。加入終止液終止反應，在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度值。
三.顆粒體蛋白GRN試劑盒樣本采集與貯存
1.細胞培養(yǎng)上清
300 g 離心 10 分鐘去除沉淀物，即刻檢測, 或者分裝，-20℃以下貯存。
2.血清樣本
分離管分離血清。在 1000 g 離心之前，使血樣凝集 30 分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測，或
者分裝，-20℃以下貯存。
3.血漿樣本
EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝收集血漿樣本。1000 g 離心 3 0 分鐘收集樣本。即刻檢測，或者
分裝，-20℃以下貯存。
本試劑盒可能適用于其它生物學樣本。細胞培養(yǎng)上清、血清和血漿已經(jīng)過驗證。
注意：檢測前，樣本中可見的沉淀必須去除。不要使用嚴重溶血或高血脂的樣本。 樣本應分裝并貯存于-20℃，以避免人 GRN 活性的丟失。如果在 24 小時內(nèi)檢測，樣本可以存放在 2 - 8℃。
避免樣本的反復凍融。在檢測前，冷凍樣本應該緩慢地恢復至室溫，輕柔地混勻。
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