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白介素試劑盒在使用方面可有什么要領(lǐng)
2022-06-24 瀏覽次數(shù)：1227
白介素試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白介素6（IL-6）水平。用純化的人白介素6（IL-6）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白介素6（IL-6），再與HRP標(biāo)記的白介素6（IL-6）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6（IL-6）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白介素6（IL-6）濃度。
白介素試劑盒的使用要領(lǐng)：
1、從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存；
2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果；
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間較好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣；
4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，較好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)未尾乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)；
5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染；
6、底物請(qǐng)避光保存；
7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)；
8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理；
9、不同批號(hào)組分不得混用；
10、如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
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