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一.【產(chǎn)品名稱】通用名稱：牙質(zhì)片層培養(yǎng)基

二.牙質(zhì)片層【包裝規(guī)格】50片/包

三.牙質(zhì)片層【預(yù)期用途】用于破骨細(xì)胞的培養(yǎng)。

骨切片檢測能與從實(shí)驗(yàn)動物（包括小鼠、大鼠、雞、兔和貓）的骨分離的破骨細(xì)胞同時使用。它已被廣泛用于研究通過直接分離于骨或培養(yǎng)自骨髓培養(yǎng)基的人破骨細(xì)胞重吸收 (4)。該領(lǐng)域當(dāng)今主要優(yōu)勢之一是通過RANK配基的增加從外周紅細(xì)胞誘導(dǎo)破骨細(xì)胞形成的技術(shù)的發(fā)展(9)。利用這項(xiàng)技術(shù)，大量功能性破骨細(xì)胞能被激活，被激活的功能性破骨細(xì)胞將在包括骨位點(diǎn)重吸收的牙質(zhì)片層在內(nèi)的礦化底層挖掘出重吸收間隙。重吸收很容易被反射光顯微鏡方法而量化。

四.牙質(zhì)片層【產(chǎn)品簡介】

牙質(zhì)片層以50片一包形式供應(yīng)，包裝于已消毒的旋轉(zhuǎn)蓋封容器內(nèi)。該片層通過紫外線殺菌并且只能在無菌環(huán)境（如層流柜）中打開。

失活的牙質(zhì)片層用作骨重吸收培養(yǎng)基。這些片層以5 mm直徑的牙質(zhì)薄片形式提供（正常厚度為0.3 mm）。每批培養(yǎng)基均經(jīng)過檢測以確保被有功能的破骨細(xì)胞重吸收。另可提供預(yù)重吸收的樣品片層以便于體外重吸收功能鑒定.

五.牙質(zhì)片層【檢驗(yàn)原理】

該產(chǎn)品被設(shè)計(jì)利用“骨切片檢測”以實(shí)現(xiàn)體外骨重吸收量化(1,2)，在“骨切片檢測”中，培養(yǎng)的破骨細(xì)胞在礦化的底層挖掘出真正的骨重吸收間隙。從該檢測的*個表述開始，在過去的16年間(1,2)，該檢測已被廣泛地應(yīng)用于研究許多因素對骨重吸收的影響且是當(dāng)今體外骨重吸收研究使用zui廣泛的方法。

六.牙質(zhì)片層【儲存條件及有效期】

該產(chǎn)品可在室溫下儲存。如果容器不打開且片層保持干燥，在保質(zhì)期內(nèi)不會出現(xiàn)變質(zhì)。

七.【適用儀器 】適用于培養(yǎng)箱使用。

八.【樣本要求】使用前取樣。

九.【檢驗(yàn)方法】

1. 牙質(zhì)片層在已消毒的塑料容器中提供。僅允許在無菌環(huán)境（如層流柜）中打開。
2. 打開容器后，需使用消毒鑷子移開消毒棉塞。然后片層應(yīng)通過顛倒試管轉(zhuǎn)移至已消毒的皮氏培養(yǎng)皿。
3. 用細(xì)鑷子將片層移至培養(yǎng)皿備用，注意不要刮到牙質(zhì)表層。該片層被設(shè)計(jì)可應(yīng)用在標(biāo)準(zhǔn)的96孔組織培養(yǎng)盤中，但是它們也能在任何類型的組織培養(yǎng)容器中使用。
4. 在增加細(xì)胞之前，牙質(zhì)片層應(yīng)被預(yù)加濕至少1小時。應(yīng)使用消毒磷酸鹽緩沖液或組織培養(yǎng)方法。
5. 去除預(yù)加濕液后，加入細(xì)胞懸濁液。加入的細(xì)胞數(shù)量取決于破骨細(xì)胞來源和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。重吸收由光顯微鏡法進(jìn)行分析，這樣就有可能測量單個破骨細(xì)胞的活性。然而，在大部分實(shí)驗(yàn)方案中，加入更多的破骨細(xì)胞將更合適（但是一般要少于200/牙質(zhì)片）。
6. 使用的沉淀時間也取決于破骨細(xì)胞來源和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。成熟的破骨細(xì)胞將在1小時內(nèi)附在牙質(zhì)片層，但是在許多方案中將需要更長的沉淀時間。培養(yǎng)基能通過使用包括自動移液管在內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)技術(shù)和設(shè)備而被改變。
7. 由成熟破骨細(xì)胞導(dǎo)致的重吸收在培養(yǎng)12小時后可被檢測出。培養(yǎng)的時間將取決于實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
8. 如果使用液態(tài)固定液，牙質(zhì)片層可在組織培養(yǎng)容器中固定。撤除受限的培養(yǎng)基且用磷酸鹽緩沖液或組織培養(yǎng)基沖洗組織培養(yǎng)孔兩次，再加入固定液。常使用的固定液是4%的戊二醛（用0.2M的甲胂酸鈉溶液配成）。
9. 重吸收凹點(diǎn)能在多種標(biāo)準(zhǔn)組織學(xué)菌株著色后鑒定。我們推薦1%的甲苯胺藍(lán)（用0.5%四硼酸鹽溶液配成）。牙質(zhì)片層應(yīng)在此甲苯胺溶液中染色3分鐘。多余的染料通過沖洗去除，然后在非蒸餾水中漂洗并風(fēng)干。已染色的片層可即在室溫下長期保存。
10. 重吸收陷窩能通過多種途徑鑒定，包括掃描電鏡和光學(xué)顯微鏡。我們推薦使用反射光學(xué)顯微鏡。
11. 使用者應(yīng)考慮一些推薦的方法以確定zui合適他們需要的技術(shù)。